骨组织脱钙是将钙离子从骨组织中去除的过程，使其柔软，便于切片和组织学分析。常用于研究骨组织结构、细胞成分和病理状态。
骨组织脱钙技术路线
1.样本固定
• 收集骨组织：将骨组织用4%多聚甲醛固定24-48小时，防止组织降解。
• 漂洗：用PBS漂洗去除固定剂。
2.脱钙
• 脱钙剂选择：常用EDTA溶液（pH 7.4）或10%甲酸溶液进行脱钙。EDTA脱钙较为缓慢，但保留组织细胞和抗原性较好；甲酸脱钙较快，但可能损伤组织。
• 脱钙时间：根据骨的大小和厚度，脱钙时间为几天至几周。使用EDTA时，通常需要2-4周。
• 溶液更换：定期更换脱钙溶液以确保脱钙效果。
• 检测脱钙完成：使用针刺或X射线检测骨的软化程度，确保脱钙完成。
3.组织处理
• 漂洗和脱水：脱钙完成后，用PBS漂洗，逐级乙醇脱水。
• 透明化和包埋：用二甲苯透明化，然后在石蜡中包埋。
4.切片和染色
• 切片：使用微切片机将石蜡包埋的骨组织切成5-7 μm厚的切片。
• H&E染色或其他染色：进行常规组织学染色或特殊染色。
骨组织脱钙技术优点
1.便于切片：脱钙使骨组织柔软，易于使用常规微切片机切片，适合后续组织学分析。
2.结构和细胞成分的保留：适当的脱钙条件能很好地保留骨组织的细胞成分和组织结构。
3.广泛应用：适用于病理诊断、组织学研究、骨发育研究及骨病变的研究。
4.多种脱钙剂选择：可根据研究需要选择不同的脱钙剂（如EDTA和酸性脱钙剂），灵活性高。
5.抗原性保存：使用温和脱钙剂如EDTA，有助于保留抗原性，适合免疫组化分析。
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