细胞划痕-细胞生物学检测-江苏知源解码生物科技有限公司

细胞划痕实验（Scratch Assay），也称为伤口愈合实验，是一种常用的体外方法，用于研究细胞迁移能力。该实验通过在细胞单层中制造“划痕”或“伤口”，然后观察细胞在划痕区域的移动速度和覆盖能力，评估细胞迁移行为。

以下是细胞划痕实验的基本技术流程：

1. 实验设计

• 确定实验目的，例如研究基因操作或药物处理对细胞迁移能力的影响。

• 选择合适的细胞系，这些细胞应具有良好的黏附性和迁移能力。

• 设置不同的实验组和对照组，包括处理组（如药物、基因操作）和阴性对照组。

2. 细胞培养

• 将细胞培养在合适的培养皿或6孔板中，培养基通常为含10%胎牛血清的完全培养基。

• 让细胞生长至90-100%汇合，形成一个均匀的细胞单层。

• 细胞汇合后，用PBS轻轻洗涤两次，去除细胞碎屑和浮游细胞。

3. 制造划痕

• 使用无菌移液枪头、细胞刮刀或无菌尖头在细胞单层上垂直划一道直线，形成一个“划痕”或“伤口”区域。

• 每个孔中可以做一条或多条平行划痕，确保不同处理组的划痕宽度和数量一致。

• 用PBS轻轻洗涤两次，去除划痕时产生的细胞碎片，避免影响后续观察。

4. 处理和孵育

• 根据实验设计，将含药物或无血清的培养基加入细胞培养皿或6孔板中。

• 将培养板放入37°C、5% CO2的培养箱中孵育。通常不加血清或使用低血清培养基，以减少细胞增殖的影响。

• 在不同时间点（如0小时、6小时、12小时、24小时等）观察划痕区域的细胞迁移情况。

5. 显微镜观察和图像拍摄

• 在显微镜下使用低倍物镜观察划痕区域的细胞迁移。

• 使用数字相机拍摄每个时间点的划痕图像，确保相同的划痕位置和焦距。

• 对于定量分析，建议使用图像分析软件（如ImageJ）测量划痕面积或宽度的变化。

6. 数据分析

• 分析划痕闭合的速度或迁移的细胞数量。可测量划痕的宽度或面积的减少，来评估细胞的迁移速度。

• 计算迁移速率（划痕宽度或面积减少的速度）。

• 比较不同实验组与对照组之间的差异，评估处理对细胞迁移能力的影响。

• 使用统计学方法（如t检验、ANOVA）分析实验结果的显著性。

地址：江苏省常州市中国科学院遗传研究中心 | 咨询热线：15189799066 | 销售咨询邮箱：sales@cellecx.com

技术支持邮箱：support@cellecx.com | 售后服务邮箱：service@cellecx.com

地址：江苏省常州市中国科学院遗传研究中心

咨询热线：15189799066

销售咨询邮箱：sales@cellecx.com

技术支持邮箱：support@cellecx.com

售后服务邮箱：service@cellecx.com

技术支持：互邦网络

科研服务