作为研究细胞迁移能力的经典实验，细胞划痕实验通过模拟体内创伤修复过程，能直观反映细胞运动和增殖特性。
▍实验前准备
1、辅助标记
使用油性记号笔在6孔板底部绘制间距1cm的平行线，建议沿直径方向延伸至孔边缘，便于后续定位观察点
2、细胞铺板
推荐接种密度：75w/孔（6孔板），24h后需形成完整单层（无空隙）
▍标准化操作流程
Step1 划痕制备
垂直握持枪头，沿预划横线匀速施力划过细胞层（200ul黄色枪头）
全程保持枪头与板底垂直，同组孔使用同一枪头
Step2 清洗规范
沿孔壁缓慢加入预温PBS，轻柔漂洗3次
液流避免直冲细胞层，防止边缘细胞脱落
Step3 培养体系
更换含指定处理因素的低血清培养基（推荐＜2%）
Step4 数据获取
以横线与划痕交点为固定监测位，划痕后立即拍摄0h基准图像，6/12/24h依次拍照（根据细胞类型调整），保持各时间点视野一致。
当细胞层厚度＞20μm时，采用Z-stack叠加拍摄（步进2μm，3层叠加）
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