H&E染色(Hematoxylin and Eosin Staining)是最常用的组织学染色方法,用于区分细胞核和细胞质成分,广泛应用于组织切片的病理学和诊断研究。
H&E染色技术路线
1.样本准备
切片:将石蜡包埋的组织切片至3-5 μm厚度。
脱蜡和再水化:切片经过二甲苯脱蜡,梯度乙醇脱水至水。
2.苏木精染色
苏木精染色:将切片浸入苏木精染色液中5-10分钟,染色细胞核。
冲洗:用自来水冲洗,去除多余染液。
蓝化:用碱性溶液(如氨水)处理切片数秒钟,使苏木精染色的细胞核显现出蓝色。
3.伊红染色
伊红染色:将切片浸入伊红染色液中1-2分钟,染色细胞质和细胞外基质。
冲洗:用自来水快速冲洗,去除多余染液。
4.脱水和透明化
脱水:将切片通过梯度乙醇脱水,最后在100%乙醇中脱水。
透明化:使用二甲苯透明化切片,以增加透明度。
5.封片
封片:用中性树胶封片剂封片,以保护染色切片。
6.观察
显微镜观察:在光学显微镜下观察染色结果,细胞核呈蓝紫色,细胞质呈粉红色。
H&E染色技术优点
操作简便:步骤简单,成本低,适合大批量样本染色。
组织结构清晰:细胞核、细胞质和细胞外基质的染色差异明显,便于组织结构的观察和分析。
广泛应用:适用于各种组织类型的形态学研究,尤其在病理诊断中具有重要作用。
结果直观:染色结果直观清晰,易于通过光学显微镜直接观察和记录。
与其他技术兼容:H&E染色切片可用于后续的特殊染色、免疫组化或分子检测。
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