肿瘤干细胞成球实验是一种用于富集肿瘤干细胞的方法。在这个实验中，单个细胞被分散在培养皿中，而不是依附于表面。大多数细胞因为无法附着而逐渐死亡，但是少数细胞可以形成细胞球体，也就是一团细胞，而且这些细胞团在体外培养时能够进行多次传代。研究发现，这些细胞球体具有肿瘤干细胞的特性，当移植到动物模型中时，它们能够生长成肿瘤并连续多次移植。 因此，细胞成球实验被广泛用于富集肿瘤干细胞。细胞球的大小和数量被认为是评估肿瘤细胞干性的重要标志，通常用细胞球形成效率（Sphere Formation Efficiency，SFE）来衡量。 成球实验操作步骤 一次成球 1、将状态良好的细胞消化后离心收集，去除含血清培养基。 2、PBS清洗细胞2次。 3、细胞计数，用超低吸附的细胞培养板培养细胞（6孔板中每孔加入大约1000个细胞）。 4、培养大约10天，观察细胞成球情况并计算SPF。 二次成球 1、70μm的细胞筛过滤收集细胞球，胰酶消化。 2、无血清培养基终止消化，PBS清洗细胞2次。 3、重悬细胞，计数。 4、用超低吸附的细胞培养板培养细胞（6孔板中每孔加入大约1000个细胞）。 5、培养大约10天，观察细胞成球情况并计算SPF。
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