基因组DNA提取-分子生物学检测-江苏知源解码生物科技有限公司

基因组DNA提取是分子生物学实验中的基本步骤，用于从细胞、组织或样本中提取高质量的DNA。此过程通常用于后续的PCR、基因分型、测序和克隆实验。以下是基因组DNA提取的基本流程及其优点：

基因组DNA提取技术路线

1.样本收集

• 组织或细胞收集：可以使用新鲜的组织、细胞培养物、血液、植物样本等。

• 组织粉碎：对于固体组织，使用液氮和研钵进行粉碎，或使用机械组织匀浆器。

2.细胞裂解

• 加入裂解缓冲液：包括SDS或其他去污剂，裂解细胞膜并释放DNA。

• 蛋白酶处理：加入蛋白酶K，在37-56°C下孵育1小时，以降解蛋白质和组蛋白，释放基因组DNA。

3.去除杂质

• RNase处理：加入RNase A以降解RNA，避免RNA污染。

• 酚/氯仿抽提：通过加入等体积的酚/氯仿混合物，涡旋混匀并离心，将蛋白质杂质分离到有机相。

4.DNA沉淀

• 加入乙醇或异丙醇：将上清液转移至新的离心管中，加入2倍体积的冷乙醇或等体积的异丙醇，轻轻混匀以沉淀DNA。

• 离心回收DNA：在4°C、10000g下离心10分钟，收集DNA沉淀。

5.DNA洗涤和溶解

• 洗涤DNA沉淀：用70%乙醇洗涤DNA以去除盐分和杂质。

• 溶解DNA：干燥DNA沉淀后，将其溶解于适量的TE缓冲液或超纯水中。

6.质量和浓度检测

• 光密度测定：使用分光光度计测定260/280 nm比值，评估DNA纯度。

• 电泳检测：通过琼脂糖凝胶电泳确认DNA的完整性。

基因组DNA提取技术优点

1.高纯度和高产量：基因组DNA提取方法能有效去除蛋白质和其他杂质，获得高纯度和高浓度的DNA。

2.适用性广：适用于多种生物样本，包括动物组织、植物组织、微生物、血液等。

3.操作简单：大多数提取方法操作步骤简便，可在常规实验室环境下完成。

4.DNA稳定性好：提取的基因组DNA稳定性高，适合长期保存和下游分子生物学实验应用。

5.自动化兼容：可与自动化提取仪器结合，实现高通量样本处理。

地址：江苏省常州市中国科学院遗传研究中心 | 咨询热线：15189799066 | 销售咨询邮箱：sales@cellecx.com

技术支持邮箱：support@cellecx.com | 售后服务邮箱：service@cellecx.com

地址：江苏省常州市中国科学院遗传研究中心

咨询热线：15189799066

销售咨询邮箱：sales@cellecx.com

技术支持邮箱：support@cellecx.com

售后服务邮箱：service@cellecx.com

技术支持：互邦网络

科研服务